1、高通量是相對(duì)于第一代測(cè)序的，第一代測(cè)序只能一次測(cè)1個(gè)樣品的1段序列，產(chǎn)生的數(shù)據(jù)量相對(duì)來(lái)說(shuō)很小，而高通量測(cè)序一次能夠產(chǎn)生的數(shù)據(jù)量在幾十G上百G，可以一次測(cè)很多的樣本。

(相關(guān)資料圖)

2、在2000年的時(shí)候，3700、MegaBace等儀器上的測(cè)序也是高通量測(cè)序，是相對(duì)手工測(cè)序或者跑平板膠來(lái)說(shuō)的。

3、不過(guò)到2005年以后，高通量測(cè)序就改指第二代測(cè)序（Next generation sequencing），454、Solexa(后改為Illumina）和SOLiD等第二代測(cè)序，比3730等第一代測(cè)序的通量提高了成千上萬(wàn)倍，甚至上億倍，所以稱為高通量測(cè)序。

4、擴(kuò)展資料原理：測(cè)序方案建立在雙脫氧測(cè)序法(Sanger等，1977)的基礎(chǔ)上。

5、為了從每一克隆插入片段兩端成對(duì)地進(jìn)行測(cè)序，每一個(gè)質(zhì)粒模板DNA板應(yīng)配備兩個(gè)384孔循環(huán)測(cè)序反應(yīng)板。

6、測(cè)序反應(yīng)采用Big Dye Terminator chemistry version 3．1(AppliedBiosystems)和標(biāo)準(zhǔn)M13或常用正向引物和反向引物。

7、測(cè)序反應(yīng)通過(guò)BiomekFX(Beckman)移液操作工作站建立。

8、機(jī)械臂負(fù)責(zé)等分模板試樣，起與反應(yīng)液混合的作用，反應(yīng)液含有雙脫氧核苷酸、熒光標(biāo)記的核苷酸、TaqDNA聚合酶、序列引物和緩沖液。

9、模板和反應(yīng)板有條形碼，且在BiomekFX移液操作工作站上有條形碼讀取器跟蹤，確保模板和反應(yīng)液轉(zhuǎn)移中沒(méi)有錯(cuò)誤。

10、30～40線性擴(kuò)增步驟連續(xù)循環(huán)在MJResearchTetrads或9700熱循環(huán)儀(Ap—pliedBiosystems)中進(jìn)行。

11、參考資料來(lái)源：百度百科-基因組高通量測(cè)序。

本文就為大家分享到這里，希望小伙伴們會(huì)喜歡。

關(guān)鍵詞